共聚焦激光扫描荧光显微镜(Confocal Laser Scanning Fluorescence Microscope;LSFM)是以激光作为激发光源,采用光源针孔与检测针孔共轭聚焦技术,对样本进行断层扫描,以获得高分辨率光学切片的荧光显微镜系统,它是在荧光显微镜成像的基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理。激光经放大、分光后由物镜聚焦于焦平面上,同时,焦平面上被激光扫描的点F所发出的一定波长的荧光通过检测针孔光栏达到检测器,并成像于显示器上,得到相应的荧光图象。
通过激光共聚焦显微镜观察荧光标记细胞内的蛋白质和分子,为生物学的研究提供了更直观的观测手段。应用领域:形态学研究(细胞凋亡、中枢神经系的F联系、肿瘤细胞分类),分子生物学(原位杂交,DNA、RNA定量,DNA损伤修复、外源性基因在真核细胞的表达、定位,荧光能量共振转移大分子构象的改变、受体与配体相互作用),活细胞动态荧光测量(细胞内Ca++、K+、H+等离子的动态分布及动态定量、荧光漂白恢复---细胞连接间的信息沟通),直接对活组织或整体胚胎观察。 |