为加强研究生学术交流活动，推进学术创新，特开通“研究生学术报告预告区”。我校研究生和教师可以在预告区及时发布和了解有关研究生学术报告的信息，届时参加。也可就某学术报告展开专题讨论与交流。
本报告通过介绍免疫共沉淀技术原理和操作步骤，以及应用免疫共沉淀技术验证弱的相互作用的研究背景来探究通过免疫共沉淀技术验证蛋白质弱的相互作用的优化条件。采用单因子法对影响免疫共沉淀结果的各因素进行优化分析，从而确定验证弱的相互作用的最佳实验条件。通过对影响免疫共沉淀实验结果的各种因素进行分析，进行多次免疫共沉淀的预实验，调整细胞裂解液各组分特别是盐离子的浓度和pH值、加入合适的抗体量、加入合适诱导产生抗原的物质的量、加入合适的交联剂，找到合适的免疫共沉淀的实验条件，从而验证蛋白质弱的相互作用。本报告就在免疫共沉淀优化的实验过程中，需要注意的问题进行了总结：①样品的处理非常关键。免疫共沉淀实验本质上是处于天然构象状态的抗原和抗体的特异性反应，而样品处理的质量决定了抗原抗体反应中抗原的质量、浓度以及抗原是否处于天然构象状态。②细胞裂解采用温和的裂解条件，不能破坏细胞内存在的所有蛋白质－蛋白质相互作用。③抗体的性质，特别是多抗的特异性是问题，抗体不同和抗原结合能力也不同，免染能结合未必能用在IP反应。④低温下进行实验，是为了防止蛋白的分解，修饰，溶解抗原的缓冲液必须加蛋白酶抑制剂。蛋白酶抑制剂有利于防止目的蛋白的降解。⑤考虑抗体/缓冲液的比例，抗体过少就不能检出抗原，过多则就不能沉降在beads上，残存在上清，缓冲剂太少则不能溶解抗原，过多则抗原被稀释。⑥确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的。