本次报告的内容主要包括以下几个方面：
(1) 正常培养条件下，突变株与野生株生理对比
为了验证基因缺失对菌体本身是否有影响，所以需要对突变体进行表型验证。通过测定其生长曲线可以判断出突变菌株与野生型菌株的生长是否有差别。
(2)有机溶剂压力条件下，突变株与野生株生理对比
实验设计：
首先，在96-well板上进行初步的筛选：分别取初始OD630为0.2的40ul突变株和野生株菌液，160ul，正常培养基和1.5%、2%的乙醇培养基于96-well板上，并设置三个平行样，在温度为30℃，光照强度为2000 Lux，转速为150rpm的光照培养箱中培养72h，每12h测一次OD630值，并绘制生长曲线，观察生长变化。
其次，在平板上对突变株进行表型筛选：一次设置1.5%、1.8%、2.0%三个乙醇浓度梯度，并设置空白平板培养基作为对照。将培养好的种子初始OD630设置为0.2，然后一次进行梯度稀释1.00、0.10、0.01，以后3个梯度点板，30℃培养约8d后分析实验结果。
最后，将96-well板和平板初步筛选出有明显生长区别的菌株进行摇瓶培养。分别取初始OD630为0.2的5ml突变株和野生株菌液,20ml正常培养基和2%的乙醇培养基于摇瓶里，并设置三个平行样，在温度为30℃，光照强度为2000 Lux，转速为150rpm的光照培养箱中培养72h，每12h测一次OD630值，并绘制生长曲线，观察生长变化。 |